Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者困难重重缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次再次出现肝细胞自身特异性到再次出现1标准型肝炎诊断病征的令人满意赴援在儿童时期就有很好的所述，多个肝细胞自身特异性无症状的儿童中都有70%在血清转换后10年内患上肝炎，而随访15年的儿童这一一般而言增高到84%。相比较之下，占诊断1标准型肝炎一半以上的标准型1标准型肝炎的中都风前提还没有人得到充分的研究工作。

越来越多的人开始可用分期系统来定义1标准型肝炎的令人满意：生物体在再次出现多种肝细胞自身特异性时进到第1收尾，再次出现血压极度时进到第2收尾，再次出现病征时进到第3收尾。一些多发肝细胞自身特异性无症状的生物体，在1期和2期，令人满意较慢，并演进为中都风的1标准型肝炎。我们以后所述了一分组在首次测定到多种肝细胞自身特异性试样后据估计10年无肝炎的想像中慢令人满意者，这分组病征人数少，但相似性非常清楚。随后，我们发现肝细胞自身免疫特异性CD8+T肝细胞反理应在令人满意极快的病征中都理论上不共存，但在近期中都风和肇因的肝炎病征中都很更容易测定到。这可能确实，与令人满意病征相比较，这些病征自身免疫反理应的可调增强。

早期研究工作确实，尽管可调性T肝细胞(Treg)存量正常，但肝炎病征共存一些系统缺陷，其中都包括对IL-2的反理应能力下降。此外，肝炎病征中都的效理应CD4+T肝细胞可能对可调更具抵抗性，平庸为效理应T肝细胞的诱导增强，自然产生的Treg和体外产生的诱导Treg，以及免疫漫长的CD4+T肝细胞中都IL-2反理应增强。本研究工作的目的是所述了CD4+可调性T肝细胞(Treg)在一小群想像中极快令人满意者中都的相似性，他们的平均成年为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究工作是一项以人群为了将的横向研究工作，在21岁一般而言胃癌的病征亲属中都检查和1标准型肝炎的危险因素。我们以后所述了长期极快令人满意者的相似性，他们保有多重肝细胞自身特异性无症状超过10年，但没有人再次出现肝炎的诊断病征，慢性或非顺利完成性自身免疫。随后，10名继续保有无肝炎并愿意提供大量血液循环试样的极快令人满意者扩及T和B肝细胞系统归纳。在以外的研究工作中都，8名慢令人满意者(SP分组)，中都位成年43岁(31-72岁)，18 - 32岁中间的肝细胞自身特异性无症状。所有的参与者都处于1标准型肝炎令人满意的1期，尽管一些人随后失去了肝细胞自身特异性对某些免疫的无症状反理应，然而，一名病征早已处于2期据估计6年，但没有人再次出现诊断病征，一名病征被胃癌为肝炎，该受试者72岁，在采集实验试样时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据归纳中都对该NADP顺利完成了另行指标。分开外周血单个氢肝细胞(PBMCs)，采用多数值流式肝细胞练成和T肝细胞诱导试验性指标NADP中都Treg的频赴援、表标准型和系统。可用FlowSOM和CITRUS(聚类检验、表征和回归)顺利完成无监督聚类归纳，指标Treg表标准型。

结果：与卫生NADP相比较，来自慢令人满意体的遗忘CD4+T肝细胞的监督聚类标示出，激活的遗忘CD4+ Treg频赴援增高，与糖皮质激素诱导的TNFR具体复合物(GITR)暗示增高有关。一名HbA1c增大的病征与令人满意极快者和比如说的对照分组相比较，Treg对光有所多种不同。系统归纳确实，与卫生NADP相比较，来自极快令人满意体的Treg内皮细胞的CD4+效理应T肝细胞诱导明显受损。平庸为对效理应CD4+T肝细胞CD25和CD134暗示的诱导增高。

布1 系统地的表标准型归纳标示出，CD4+Treg亚标准型在慢令人满意字段中都增高。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有NADP的活CD4+CD45RA -肝细胞上。根据标明物暗示检验出10个元簇:遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)可用9个多种不同Treg标明生成的10个元簇的MST。每个链表代表一个战斗群(100个战斗群)，更大的元战斗群(10个元战斗群)在链表分组周围上色。每个链表中都的饼布说明单个标明的暗示等级。(b)每个元聚类的热布，以标示出整体标明暗示。(c, d)为HD分组(c)和SP分组(d)生成布，以及FlowSOM标明的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对于丰度为每个metacluster箱3](丰度> 0.05%)断定为HD和SP分组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T肝细胞(l)。浅白色白点代表慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检查和。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 可用CITRUS的预测模标准型证实，Treg频赴援的增高是令人满意极快的徽标。基准除此以外(a - f)和柑橘归纳(g-k)比较SP参与者和比如说的HD参与者在CD4+CD45RA−T肝细胞上的区别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群体的纪念性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3石英砂，然后通过HLA-DR和GITR暗示顺利完成分开，模拟FlowSOM社会群体。(b) HD(环纹)和SP(蓝点)分组以及NADPSP 606(浅白色)中都CD25+ cd127的频赴援概述布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外次子集的箱3];(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)油菜簇球状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3暗示切变著色，箭头厚实的簇被标明为SP和HD字段中间的多种不同。(j)箱3]标示出了在SP(蓝点)和HD(灰点)分组中都，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相对于丰度(一般而言)。(k)数据集标示出每个簇的表标准型(粉红色)和Treg标明相对于暗示与背景暗示(白色);上列，磁盘Treg_3;下面一行，磁盘Treg_4。背景与所有其他簇中都标明的暗示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检查和

布3 与卫生献血者相比较，令人满意极快者遗忘treg的GITR增高。每个遗忘CD4+T肝细胞元簇(遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)测定每个暗示标明的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的暗示热布(sp606不包括在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇中都所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(浅白色)的FlowSOM GITR暗示串联，标示出数据集(c)和概述布(d)。Wilcoxon配对符号秩和检查和，p< 0.07(浅白色)所有NADP包括，p< 0.05(白色)NADPSP 606和比如说的HD不包括在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR暗示，从基准除此以外，从所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(浅白色)串联，标示出数据集(e)和概述布(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检查和

布4 来自极快令人满意的CD4+ treg肝细胞掌控效理应CD4+T肝细胞的能力下降。SP分组用白色的直通和白点说明，HD分组用白色的直通和白点说明，浅白色的直通/白点说明NADPsp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞顺利完成分选。CD4+CD25−(转发者)被标明为CFSE, Treg按捕捉到的一般而言指示剂。用抗CD3 /28微珠酪氨酸肝细胞，指导3天后顺利完成流式肝细胞练成测定。(a-d)与CD4+转发者相对于理应的treg指导(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者指导。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE诱导一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导一般而言。可用无症状对照(激活的响理应肝细胞内含treg)计数诱导一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 效理应CD4+T肝细胞对极快令人满意的T肝细胞酪氨酸的诱导更寻常。SP分组用白色的直通和白点说明，HD分组用白色的直通和白点说明，浅白色的直通/白点说明NADPsp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞顺利完成分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标明，treg按捕捉到的一般而言指示剂。用抗CD3 /28微珠酪氨酸肝细胞，指导3天后顺利完成流式肝细胞练成(CD25反染)和肝细胞因次子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606转发者携手指导。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE诱导百分赴援(b)。(c,d) CD25诱导百分赴援(c)和CD134诱导百分赴援(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导中都的暗示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们得出的假设是，来自极快令人满意次子的酪氨酸遗忘CD4+Treg在GITR暗示中都得到了适配和丰富，重申了进一步研究工作Treg在1标准型肝炎安全性生物体中都的表观的合理性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28